Kit de cultivo a gran escala de células NK|Sangre umbilical|Célula Yocon

Kit de cultivo a gran escala de sangre del cordón umbilical nk:Un sistema modular que utiliza cócteles de citocinas definidos (NK-A/B/C) para la expansión de células NK sin alimentador, que entrega> 90% de viabilidad y 70–90% de pureza a escalas de hasta 5 × 10⁶ Celdas/ml. （ZL201510624087.4）
Medio de cultivo de reparación inmune:Un medio sin componente de nivel animal de GMP que repara PBMC dañados a través de la cebado IL-2/IL-15, reduciendo las tasas de falla del cultivo en un 40-60% en muestras subóptimas.
Medio sin suero de células NK (albúmina humana recombinante):Un medio sin xeno definido químicamente mantenimiento> 90% de viabilidad durante más de 5 días a células de 5 × 10⁶/ml, optimizado para la integración del biorreactor del sistema cerrado.
Bolsas de cultivo FEP (2L):Bolsas de polímero FEP inertes (transparentes, -196 ° C a +137 ° C duraderos) que permite rendimientos 20-40% más altos que EVA a través de una mayor permeabilidad de gas y puertos estériles sin agujas.
（Número de catálogo: DMF）：（ NC1011 ： 37754 ； NC0102.H ： 37874 ； NC0102.f ： 40625 ； FP0002 ： 041754）

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Alta eficiencia de rendimiento

La principal ventaja de nuestro kit es su capacidad incomparable para lograr consistentemente altos rendimientos de células NK funcionales de la sangre umbilical, lo cual es crucial para aplicaciones clínicas y de investigación exitosas.

Adaptabilidad a medida

Su modularidad única ofrece una flexibilidad inigualable, lo que le permite adaptar con precisión el proceso de cultivo a volúmenes de sangre específicos. Este enfoque minimiza significativamente los desechos y maximiza la eficiencia, optimizando su utilización de recursos.

Funcionalidad celular robusta

A través de un entorno de cultivo cuidadosamente formulado, el kit garantiza una expansión celular robusta al tiempo que mantiene la funcionalidad vital de las células NK, empujando los límites de lo que se puede lograr en la investigación y la terapia de células inmunes

Caso de expansión de células NK

Muestra	Duración de transporte	criopreservado	Proporción anticoagulante	Número de inoculación	de volumen final	Duración de cultivo	Doblo	Células cosechadas	NK Fenotipo
1	Aproximadamente 24 h	Criopreservado	21.5%	60 millones	4L	26 días	253	15.2 mil millones	99.05%
2	Aproximadamente 24 h	Fresco	18.7%	60 millones	6.3L	27 días	428	25.7 mil millones	98.54%
3	Aproximadamente 24 h	Criopreservado	25.0%	20 millones	6.3L	28 días	370	7.4 mil millones	98.67%
4	Aproximadamente 24 h	Fresco	20.0%	120 millones	12.9L	29 días	408	48.9 mil millones	99.22%
5	Aproximadamente 24 h	Fresco	19.0%	60 millones	6.12L	28 días	351	21 mil millones	97.52%

Información del producto

Kit de cultivo a gran escala NK —— Componentes estándar

Nombre del producto	Número de catálogo	Aplicación	Especificación	Almacenamiento
Medio de cultivo de reparación de células inmunes	NC0102.F	Utilizado para la activación temprana de las células NK	1 botella, 200 ml/botella	2 ~ 8 ° C
Sero: medio de cultivo libre para células NK (albúmina humana recombinante)	NC0102.H	Cultivo in vitro de células NK	6 botellas, 1l/botella	2 ~ 8 ° C
Kit de inducción y expansión de células NK (versión de alto rendimiento)	AN0104 - 2	YC00A: Se utiliza para recubrimiento de matraces de cultivo durante la cultura inicial	1 vial, 500 μl/vial	-20 ° C
		YC00B: Agregado durante la cultura inicial	1 vial, 500 μl/vial
		YC00C: agregado al medio de cultivo de activación	1 vial, 200 μl/vial
		YC005: Se agregó al medio de cultivo de expansión	3 viales
		Gentamicina: se agregó al medio de cultivo para su uso	1 vial, 300 μl/vial
Bolsa de cultivo FEP (2L)	FP0002 - 2	Cultivo in vitro de células NK	3 piezas	Temperatura ambiente

Kit de cultivo a gran escala NK —— Componentes estándar

Nombre del producto	Número de catálogo	Especificación	de la aplicación	Almacenamiento
Medio de reparación de células inmunes (Red Fenol - Free)	NC0111	Para la pre -activación de las células NK	1 botella, 200 ml/botella	2 ~ 8 ° C
Sero celular NK - Medio libre	NC0102	Cultivo in vitro de células NK	2 botellas, 1l/botella	2 ~ 8 ° C
Kit de inducción y expansión de células NK (versión de alto rendimiento) - Sistema 1L	AN0104 - 1	YC00A: para recubrimiento de botellas de cultivo durante la cultura inicial	1 vial, 250 μl/vial	-20 ° C
		YC00B: para su adición durante el cultivo inicial	1 vial, 250 μl/vial
		YC00C: Adición al medio de activación	1 vial, 100 μl/vial
		YC005: Adición al medio de expansión	1 vial
		Gentamicina: para su adición al medio de cultivo	Gentamicina: 1 vial, 300 μl/vial
Factor nk yc005	YC005 - 1	Adición al medio de expansión	1 vial	2 ~ 8 ° C
Bolsa de cultivo FEP (2L)	FP0002 - 2	Cultivo in vitro de células NK	1 pieza	Temperatura ambiente

Pautas de uso

La modularidad del kit permite un control preciso sobre el proceso de cultivo. Comience con los componentes estándar durante aproximadamente 80 g de sangre umbilical o 50 ml de sangre umbilical pura. Por cada 20 g adicional de sangre umbilical más allá de esto, integre un componente de expansión para garantizar una disponibilidad óptima de nutrientes y factores, permitiendo un crecimiento celular proporcional y logrando los recuentos de células objetivo.

P1: ¿Qué muestras son adecuadas para la sangre del cordón umbilical a gran escala de cultivo de células nk?

Las muestras transportadas dentro de las 8 horas con anticoagulante ≤28% y las muestras transportadas de 8 a 24 horas con anticoagulante ≤25% pueden cultivarse usando plasma autólogo.
Para muestras con relaciones anticoagulantes incompatibles, los sustitutos de sangre comerciales validados o el suero AB humano pueden reemplazar el plasma autólogo.

P2: ¿Cómo evaluar la calidad de las células mononucleares de sangre del cordón umbilical (MNC)?

Las muestras con tiempos de transporte más cortos y relaciones anticoagulantes más bajas producen multinacionales de mayor calidad.
Después de la lisis de los glóbulos rojos, la relación de glóbulos rojos debe ser <50%.
Para las empresas multinacionales criopreservadas: reparar células en medio inmunorepair antes del cultivo. La apoptosis espontánea posterior a la reparación debe ser ~ 20%.

P3: Usted recomienda sembrar células 6e7/matraz T75. ¿Puedo aumentar o disminuir el inóculo?

No recomendado. Ajustar el inóculo puede causar cantidades de factores no coincidentes en el kit, comprometiendo el rendimiento o la pureza de la célula final.

P4: Si el número de multinacionales aislados es insuficiente para dos matraces T75, ¿qué debo hacer? Inoculación

Semilla 1 matraz T75 (células 6E7) y suplemento con 1–2 matraces T25 para utilizar las células restantes.

del esquema de noculación Inoculación	del contenedor	por botella	Número de botellas inoculadas	Número de células
Esquema 1	T75	6.00E+07	2 botellas	1.20E+08
Esquema 2	T75	6.00E+07	1 botella	1.00E+08
Esquema 2	T25	2.00E+07	2 botellas	1.00E+08
Esquema 3	T75	6.00E+07	1 botella	8.00E+07
Esquema 3	T25	2.00E+07	1 botella	8.00E+07

Q5: ¿Se pueden usar células mononucleares criopreservadas para el cultivo de células de sangre umbilical de la sangre umbilical a gran escala?

Sí. Preferiblemente use el medio de criopreservación de una sola célula YouKang u otros medios de criopreservación de inmunocitos validados. Asegure la viabilidad celular posterior a la descongelación ≥90%. Debido al daño inducido por la criopreservación, una porción de las células puede sufrir apoptosis después de la inoculación. Recomendamos 'reparación antes del cultivo ': incubar células descongeladas en medio inmunorepair para restaurar la viabilidad antes de continuar.

P6: ¿Debo seguir estrictamente el protocolo de alimentación del manual?

Días 3 y 5: Siga el manual estrictamente para la alimentación y la suplementación con plasma.
Después del día 7: ajuste la alimentación según el estado de la célula (por ejemplo, reduzca el volumen si la actividad metabólica se ralentiza).

P7: ¿Cómo determinar si continuar alimentando a 8L o 12L después de alcanzar 6L?

La mayoría de las muestras calificadas pueden alcanzar 6L; Algunos pueden escalar a 12L. Indicador clave: si los números de células se duplican dentro de los 2 a 3 días después de la alimentación, el cultivo conserva una fuerte capacidad de expansión, sobre la alimentación adicional.